柱前衍生—液相色谱法分析河流水中草甘膦及其代谢产物

  草甘膦(glyphosate),化学名称:N-(膦酸甲基)α--甘氨酸,化学分子量:169.08,分子式:C3H8NO5P,化学结构式如下:

  草甘膦是一种有效的除草剂,对多年生根杂草非常有效,广泛用于橡胶、桑、茶、果园及甘蔗地。虽然草甘膦属于低毒类有机磷农药,但其不合理的使用仍会导致植物体中的残留量过高,世界各国对其在不同样品中的残留量进行了严格的规定。
  草甘膦及其主要代谢产物氨甲基磷酸均为强极性两性化合物,不溶于大部分有机溶剂,挥发性差,无紫外吸收,对其定量分析有一定困难,本方案以芴甲氧羰酰氯(FMOC-CL)为衍生试剂,建立了柱前衍生--液相色谱法分析河流水中草甘膦及其代谢产物氨甲基磷酸的方法。

柱前衍生方法:

  取10ml河流水,分别加0.5ml硼酸缓冲液(12.36g硼酸溶于140ml水中,逐滴加氢氧化钠溶液,至pH值9.5,加水至200ml),FMOC溶液2.6ml(0.1g FMOC溶液加丙酮至100ml),振摇5min,静置30min,待充分反应后,加乙酸乙酯5ml,振摇5min,弃去有机层,浓缩待分析。

色谱分析方法:

色谱柱 InertSil ODS-3(4um,4.6*150mm)货号:5020-04645
流动相 A:CH3CN
B:50mM磷酸缓冲液(6.8g KH2PO4溶解于1L水中,用磷酸调节pH至2.5)
A:B =35:65---保持8.5min---70:30---保持3min
流速 0.7ml/min
柱温 40摄氏度
检测波长 Ex. 270nm,Em. 315nm
进样量 10ul

分析结果:

  在上述色谱条件下,目标物草甘膦衍生物FMOC--Gly及草甘膦代谢产物FMOC--AMAP可以得到充分保留和分离,而后增大乙腈比例,将杂质组分冲洗干净,整个分析周期在30min'内完成。对于浓度水平20ug/l的目标物,分析结果以峰面积计算,2种物质的变异系数(标准差与平均数的比值)为0.6%左右(n=5);当浓度水平为2ug/l的目标物,分析结果以峰面积计算,草甘膦及其代谢产物的变异系数分别为9.6%和6.2%,