【2015版中国药典-中药篇】羌活分析

■《中国药典》 收载情况

【来源】 本品为伞形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang或宽叶羌活Notopterygium franchetii H.de Boiss.的干燥根茎和根。春、秋二季采挖,除去须根及泥沙,晒干。
【功能与主治】 解表散寒,祛风除湿,止痛。用于风寒感冒,头痛项强,风湿痹痛,肩背酸痛。
【含量测定】 羌活醇、异欧前胡素照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(44:56)为流动相;检测波长为310nm。理论板数按羌活峰计算应不低于5000。
对照品溶液的制备:取羌活醇对照品、异欧前胡素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lmL含羌活60µg、欧前胡素30µg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备:取本品粉末(过三号筛)约0.4g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密甲醇50mL,称定重量,超声处理(功率250W,频率50kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法:分别精密吸取对照品溶液5µL与供试品溶液5〜10µL,注入液相色谱仪,测定,即得。

■干姜药材高效液相色谱方法的建立

【色谱行为描述】
  《中国药典》中羌活的含量测定以羌活醇、异欧前胡素为质量评价依据,羌活醇和异欧前胡素在InertSustainSwift C18(4.6×250mm,5μm)中的色谱行为是:在流动相组成为乙腈-水系统时,流动相的比例对羌活醇和异欧前胡素及其相邻色谱峰的分离具有显著的影响,流动相乙腈的比例在40,水的比例在60时,其分离度最好,选择乙腈的比例在38%~42%(v/v)之间均可获得较好的分析效果;柱温对羌活醇、异欧前胡素的保留时间及其相邻色谱峰的分离度有微小影响,经考察建议更优温度为40℃。推荐流动相配比范围:乙腈:水=(38-42):(62-58),柱温范围:30~40℃。综上所述,经考察在流动相乙腈-水比例为40:60,柱温40℃的色谱条件下能得到较满意的分析效果。
样品来源: 本品为伞形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang或宽叶羌活Notopterygium franchetii H.de Boiss.的干燥根茎和根。
对照品: 羌活醇(成都曼斯特生物科技有限公司,批号:MUST-15062915,含量:99.99%);
     异欧前胡素(成都曼斯特生物科技有限公司,批号:MUST-15040214,含量:99.46%)
对照品溶液的制备: 取羌活醇对照品、异欧前胡素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lmL含羌活60µg、欧前胡素30µg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备: 取本品粉末(过三号筛)约0.4g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密甲醇50mL,称定重量,超声处理(功率250W,频率50kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

推荐使用色谱条件:   仪器配置:
色谱柱: InertSustainSwift C18(4.6×250mm,5μm )   LC-20AD 低压泵
流动相: 乙腈-水(40:60)   SPD-20AV紫外可见光检测器
柱温: 40℃   DGU-20A3脱气机
检测波长: 310nm   CTO-20AS柱温箱
流速: 1.0mL/min   SIL-20AD自动进样器
进样量: 5μL    

■羌活醇对照品溶液:

■异欧前胡素对照品溶液:

■供试品溶液:

■羌活醇标准曲线:

■羌活醇的重复性:

序号 对照品(5μL) 样品(5μL)
t/min 峰面积 t/min 峰面积
1 33.565 922543 33.906 825394
2 33.938 921513 33.852 817599
3 33.818 911933 33.766 821876
平均值 33.774 918663 33.841 821623
RSD/% 0.56 0.64 0.21 0.48

■异欧前胡素标准曲线:

■异欧前胡素的重复性:

序号 对照品(5μL) 样品(5μL)
t/min 峰面积 t/min 峰面积
1 47.699 144596 48.340 144079
2 48.377 145174 48.230 144894
3 47.934 142690 48.097 145451
平均值 48.003 144153 48.222 144808
RSD/% 0.72 0.90 0.25 0.48

* 实验数据由北京大学医学部陈世忠教授课题组提供