西洋参中人参皂苷的测定

SGLC-LC-103

摘要:本文建立了西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm,5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1,人参皂苷Rb1峰的理论塔板数为635456,远大于《中国药典》要求的5000;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为2.216,并且3个人参皂苷与相邻杂质峰能达到基线分离;标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于2% (n=3),满足《中国药典》要求。此方法可为西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的检测提供参考。
关键词:西洋参 人参皂苷 Shim-pack GISS C18 HPLC

1. 实验部分

1.1 实验仪器及耗材

■Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
■色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07);
■WondaDisc针式过滤器(P/N:8810-21322);
■LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
■WondaPipet移液枪:WondaPipet PMII-100(P/N:8510-10004)、WondaPipet PMII-1000(P/N:8510-10006)。

1.2 分析条件

色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07)
柱温: 40℃
检测波长:203 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:10 μL
流动相:A:0.1%磷酸水溶液 B:乙腈

时间(Min) 0 25 60 90 100
A(%) 81 80 60 45 40
B(%) 19 20 40 55 60

1.3 对照品溶液的制备

取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 0.1 mg、人参皂苷Re 0.4 mg、、人参皂苷Rb1 1 mg的溶液,即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品粉末(过三号筛)约1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入水饱和的正丁醇50 mL,密塞,称定重量,置水浴中加热回流1.5小时,放冷,再称定重量,用水饱和的正丁醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取滤液25 mL,置蒸发皿中,蒸干,残渣加50%甲醇适量使溶解,转移至10 mL量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件(1.2)进行采集,对照品溶液色谱图和样品色谱图如下:

对照品溶液:

名称 保留时间 峰面积 峰高 拖尾因子 理论塔板数 分离度
人参皂苷Rg1 38.781 366193 28564 0.997 197531 ---
人参皂苷Re 39.522 1097718 91692 0.995 234133 2.193
人参皂苷Rb1 58.147 2158805 217591 0.831 712911 61.857

供试品溶液:

重现性

对照品溶液重现性

峰号 保留时间(min) 面积(Area)
数据1 数据2 数据3 RSD(%) 数据1 数据2 数据3 RSD(%)
1 38.768 38.809 38.781 0.05 367183 366374 366193 0.14
2 39.511 39.545 39.522 0.04 1101129 1098202 1097718 0.17
3 58.167 58.164 58.147 0.02 2169104 2158389 2158805 0.28

供试品溶液重现性

峰号 保留时间(min) 面积(Area)
数据1 数据2 数据3 RSD(%) 数据1 数据2 数据3 RSD(%)
1 38.770 38.737 38.736 0.05 217005 216658 216191 0.19
2 39.508 39.480 39.478 0.04 1412414 1410808 1408994 0.12
3 58.166 58.134 58.137 0.03 3364218 3363735 3368496 0.08

3. 结论

  本文建立了西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm,5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1,人参皂苷Rb1峰的理论塔板数为635456,远大于《中国药典》要求的5000;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为2.216,并且3个人参皂苷与相邻杂质峰能达到基线分离,标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于2% (n=3),满足《中国药典》要求。此方法可为西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1的检测提供参考。

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