复方丹参片中人参皂苷和三七皂苷的测定

SGLC-LC-104

摘要:本文建立了复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm,5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1,人参皂苷Rg1峰的理论塔板数为188344,远大于《中国药典》要求的6000;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为3.136,远大于《中国药典》要求的分离度1.8;并且标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于2% (n=3),满足《中国药典》要求。此方法可为复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的检测提供参考。
关键词:复方丹参片 人参皂苷 三七皂苷 Shim-pack GISS C18 HPLC

1. 实验部分

1.1 实验仪器及耗材

■Shimadzu LC-20AD高效液相色谱仪;
■色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07);
■WondaDisc针式过滤器(P/N:8810-21322);
■LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
■WondaPipet移液枪:WondaPipet PMII-100(P/N:8510-10004)、WondaPipet PMII-1000(P/N:8510-10006)。

1.2 分析条件

色谱柱:Shim-pack GISS C18 (4.6×250 mm,5 μm;P/N:227-30061-07)
柱温: 30℃
检测波长:203 nm
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
流动相:A:水 B:乙腈

时间(Min) 0 35 55 75 100
A(%) 81 81 71 71 60
B(%) 19 19 29 29 40

1.3 对照品溶液的制备

取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、三七皂苷R1、人参皂苷Re对照品适量,精密称定,加70%甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 及人参皂苷Rb1各0.2 mg,三七皂苷R1及人参皂苷Re各 0.05 mg的混合溶液,即得。

1.4 供试品溶液的制备

取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取约1 g,精密称定,精密加入70%甲醇50 mL,称定重量,超声处理(功率250W,频率33kHz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

2. 结果及讨论

按照上述色谱条件(1.2)进行采集,对照品溶液色谱图和样品色谱图如下:

对照品溶液:

名称 保留时间 峰面积 峰高 拖尾因子 理论塔板数 分离度
三七皂苷R1 40.632 317423 7156 0.999 18730 ---
人参皂苷Rg1 49.175 1501685 91128 0.988 194929 10.463
人参皂苷Re 50.481 313906 21778 0.986 266273 3.123
人参皂苷Rb1 85.602 1293596 80095 0.801 600494 84.305

供试品溶液:

名称 保留时间 峰面积 峰高 拖尾因子 理论塔板数 分离度
三七皂苷R1 40.294 410452 9191 0.993 18334 ---
人参皂苷Rg1 49.031 1875367 112181 0.988 188344 10.641
人参皂苷Re 50.359 229949 14473 1.001 260044 3.136
人参皂苷Rb1 85.556 1118211 67324 0.801 577419 83.269

重现性

对照品溶液重现性

峰号 保留时间(min) 面积(Area)
数据1 数据2 数据3 RSD(%) 数据1 数据2 数据3 RSD(%)
1 40.766 40.632 40.373 0.49 316619 317423 317035 0.13
2 49.225 49.175 49.042 0.19 1500838 1501685 1501522 0.03
3 50.523 50.481 50.353 0.18 313364 313906 314248 0.14
4 85.724 85.602 85.526 0.12 1294887 1293596 1314149 0.88

供试品溶液重现性

峰号 保留时间(min) 面积(Area)
数据1 数据2 数据3 RSD(%) 数据1 数据2 数据3 RSD(%)
1 40.294 40.95 39.804 1.43 410452 409642 415400 0.76
2 49.031 49.441 48.928 0.55 1875367 1879569 1882779 0.20
3 50.359 50.714 50.284 0.46 229949 225645 228504 0.96
4 85.556 85.631 85.663 0.06 1118211 1124542 1114170 0.47

3. 结论

  本文建立了复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的HPLC测定方法。结果表明,采用色谱柱Shim-pack GISS C18(4.6×250 mm,5 μm )分析人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1,人参皂苷Rg1峰的理论塔板数为188344,远大于《中国药典》要求的6000;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re的分离度为3.136,远大于《中国药典》要求的分离度1.8;并且标准品溶液和供试品溶液的保留时间和峰面积RSD小于3% (n=3),满足《中国药典》要求。此方法可为复方丹参片中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的检测提供参考。

资料下载