食品中N-二甲基亚硝胺的测定
2024年3月22日
摘要：本文建立了腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼中N-二甲基亚硝胺的GC-MS/MS测定方法。参照国标GB 5009.26-2023，采用岛津SHIMSEN QuEChERS产品对腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼样品进行净化，SH-Wax色谱柱进行分离，岛津串联质谱GCMS-TQ8050NX结合PTV程序升温进样技术进行检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：腊鱼和腊肉为1.0μg/kg；牛肉和鲤鱼为0.5μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，腊肉、腊鱼、牛肉和鲤鱼的加标回收率分别为腊肉98.41%、70.55%、106.39%和97.85%；RSD分别为4.03%、2.72%、12.04%和8.58%，回收率高，重现性好。该方法可为腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼等食品中N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。
关键词：SHIMSEN QuEChERS SH-Wax N-二甲基亚硝胺 食品 GCMS-TQ8050 NX
1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
仪器配置：岛津GCMS-TQ8050NX气相色谱-质谱联用仪+ PTV-2030程序升温进样口；
纯水机：PR-FP-0120α-MT1（+ 60L水箱+取水器）
色谱柱：SH-Wax（30×0.25mm，0.5μm；P/N：R221-75894-30)；
SHIMSEN QuEChERS提取盐包：4g MgSO4, 1g NaCl for NDMA in Food, 50/P（P/N：380-00147-03）；
SHIMSEN QuEChERS PLS-A净化管：150mg PLS-A for NDMA in Food,15mL,50/P（P/N：380-00147-04）；
SHIMSEN QuEChERS除水管：1.6g MgSO4, 0.4g NaCl for NDMA in Food,15mL,50/P（P/N：380-00147-07）；
N-亚硝胺类标准品套装,1000ppm（包括：N-二甲基亚硝胺标准溶液1mL，1支；N-二甲基亚硝胺-D6内标标准溶液1mL，1支；P/N：380-03900-55）；
SHIMSEN Disc HPTFE针式过滤器（P/N：380-00341）；
GC-MS认证样品瓶LabTotal Vial（P/N：227-34002-01）；
SHIMSEN Pipet移液枪：SHIMSEN Pipet PMII-10（P/N：380-00751-02）；
SHIMSEN Pipet PMII-100（P/N：380-00751-04）；
SHIMSEN Pipet PMII-1000（P/N：380-00751-06）。
1.2 分析条件
GC条件
毛细管柱：SH-Wax（30×0.25mm，0.5μm；P/N：R221-75894-30)
程序升温：初始温度40℃保持0.5min，以15℃/min升温到190℃，再以25℃/min升温到240℃，保持5min
PTV进样口温度：初始温度50℃保持0.5min，以400℃/min升温到220℃，保持5min
PTV放空时间：0.16min
载气：He
载气控制方式：恒流模式，1mL/min
进样量：5μL
进样方式：不分流进样
质谱条件
电离模式：电子轰击电离（EI）
离子源温度：250℃
接口温度：250℃
检测器电压：调谐电压+0.6Kv
数据采集模式：MRM
各化合物MRM参数如下：
1.2 混合标准使用液的制备
提取
准确称取5g样品（腊鱼、腊肉；精确至0.01g），加入5mL水，手动摇匀；或准确称取10g样品（牛肉、鲤鱼；精确至0.01g）；加入N-二甲基亚硝胺内标溶液（1μg/mL）50μL，向其准确加入10mL乙腈，手动振摇2min，置于-20℃冰箱冷冻20min，加入陶瓷均质子1粒（P/N：380-00171）及SHIMSEN QuEChERS提取盐包（4g MgSO4, 1g NaCl for NDMA in Food, 50/P；P/N：380-00147-03）；手动振摇2min；置于10℃冷冻离心机中，9000r/min冷冻离心5min；上清液待净化。
净化
向SHIMSEN QuEChERS PLS-A净化管（150mg PLS-A for NDMA in Food,15mL,50/P；P/N：380-00147-04）中加入5mL水，手动振摇后，立即加入上述上清提取液5mL，手动振摇1 min；10℃冷冻离心机中，9000r/min冷冻离心5min。
除水
取上述上清净化液加入至SHIMSEN QuEChERS除水管（1.6g MgSO4, 0.4g NaCl for NDMA in Food,15mL,50/P；P/N：380-00147-07）中；手动振摇2min；10℃冷冻离心机中，9000r/min冷冻离心5min；取上清液过0.22 μm微孔滤膜，供GC-MS/MS分析。
样品前处理流程图见下图1。
2. 实验结果
2.1 标准品溶液的MRM色谱图
2.2 腊鱼、腊肉、牛肉和鲤鱼中N-二甲基亚硝胺的GC-MS/MS检测添加回收结果
对空白样品加标后（添加浓度：腊鱼和腊肉为1.0μg/kg；牛肉和鲤鱼为0.5μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，腊肉、腊鱼、牛肉和鲤鱼的加标回收率分别为腊肉98.41%、70.55%、106.39%和97.85%；RSD分别为4.03%、2.72%、12.04%和8.58%，回收率高，重现性好。
3. 结论
本文建立了腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼中N-二甲基亚硝胺的GCMS测定方法。参照国标GB 5009.26-2023，采用岛津SHIMSEN QuEChERS产品对腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼样品进行净化，SH-Wax色谱柱进行分离，岛津串联质谱GCMS-TQ8050NX结合PTV程序升温进样技术进行检测分析。对空白样品加标后（添加浓度：腊鱼和腊肉为1.0μg/kg；牛肉和鲤鱼为0.5μg/kg），按照上述前处理方法处理后上机，平行3份样品考察回收率和RSD，结果显示，腊肉、腊鱼、牛肉和鲤鱼的加标回收率分别为腊肉98.41%、70.55%、106.39%和97.85%；RSD分别为4.03%、2.72%、12.04%和8.58%，回收率高，重现性好。该方法可为腊肉、腊鱼、牛肉、鲤鱼等食品中N-二甲基亚硝胺的测定提供参考。